| 甲酸脱氢酶的固定化及酶学性质的研究 | |
| 宋艳艳 | |
| Subtype | 理学硕士 |
| Thesis Advisor | 华绍烽 |
| 2012-05-25 | |
| Degree Grantor | 中国科学院研究生院 |
| Department | OSSO国家重点实验室 |
| Degree Discipline | 物理化学 |
| Keyword | 甲酸脱氢酶 磁性壳聚糖微球 磁性二氧化硅载体 固定化 酶学性质 Formate Dehydrogenase Magnetic Chitosan Microspheres Magneticsilica Supporters Immobilization Enzymic Properties |
| Abstract | 本论文将磁性材料用于甲酸脱氢酶的固定化，得到的固定化酶催化甲酸盐脱氢生成二氧化碳，实现辅酶再生。将甲酸脱氢酶分别固定在磁性壳聚糖微球和磁性二氧化硅载体上。 酶固定化后稳定性增加，易从反应系统中分离，能重复使用。 分别采用反相悬浮交联法和共沉淀法制备磁性壳聚糖微球载体， 并对其形貌结构进行了比较，结果表明，采用共沉淀法制备的磁性壳聚糖微球担载 Fe3O4 的效果好，故将其作为载体固定甲酸脱氢酶。最佳固定化条件：添加酶量 9 U∙g-1，pH 值 7.0，固定化时间 5 h。游离酶和固定化酶的最适反应温度分别为 50 ℃和30 ℃；游离酶的最适 pH值为 7.0，而固定化酶的最适 pH值为 6.0；将游离酶和固定化酶分别置于 60 ℃恒温水浴中放置 180 min 后，游离酶和固定化酶的残余酶活分别为 0.78 %和40.39 %；将游离酶和固定化酶分别置于不同 pH值的缓冲液中保存一小时后，固定化酶活力没有明显下降，但游离酶活大大降低；固定化酶重复使用 6次后，其残余酶活为 73.53 %。 采用戊二醛活化的磁性二氧化硅载体固定甲酸脱氢酶。最佳固定化条件：添加酶量 6 U∙g-1，pH值7.0，固定化时间 5 h。游离酶和固定化酶的最适反应温度分别为 50 ℃和 60 ℃；游离酶的最适 pH 值为 7.0，而固定化酶的最适 pH 值为6.0；将游离酶和固定化酶分别置于 60 ℃恒温水浴中放置 180 min 后，游离酶和固定化酶的残余酶活分别为 0.78 %和59.54 %；将游离酶和固定化酶分别置于不同pH值的缓冲液中保存一小时后，固定化酶活力没有明显下降，但游离酶活大大降低；固定化酶重复使用 6次后，其残余酶活为 77.66 %。 结果表明，固定化酶具有较好的热稳定性、酸碱稳定性和操作稳定性。 |
| Funding Project | 均相催化催化研究组 |
| Document Type | 学位论文 |
| Identifier | http://ir.licp.cn/handle/362003/2848 |
| Collection | 羰基合成与选择氧化国家重点实验室（OSSO） |
| Recommended Citation GB/T 7714 | 宋艳艳. 甲酸脱氢酶的固定化及酶学性质的研究[D]. 中国科学院研究生院,2012. |
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| 201242宋艳艳.pdf（2366KB） | 开放获取 | CC BY-NC-SA | View Application Full Text | |||
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